TaqMan One Step RT-qPCR Kit（Probe qRT-PCR）
产品特性
| 产品名称： | TaqMan One Step RT-qPCR Kit（Probe qRT-PCR） |
| 单位： | 盒 |
| 规格： | 50T/200T（25µl 体系为例） |
| 试剂组成： | 25×One Step RT-qPCR RTase mix |
| 5×One Step RT-qPCR Buffer | |
| 10×Enhancer | |
| 储存条件： | -20℃保存长期保存，使用前应混匀，避免反复冻融。 |
| 反应条件和体系配制： | 见说明书 |
| 质量控制： | 1. 功能检测：qPCR 的敏感性、特异性、可重复性； |
| 2. 无外源核酸酶活性，无外源内切、外切核酸酶污染。 |
试剂原理
TaqMan One Step RT-qPCR kit首先利用反转录酶RTase将RNA反转录成cDNA，再以cDNA为模板通过热启动DNA扩增酶在单管闭管反应体系中连续进行PCR扩增反应，利用荧光标记探针（Probe）水解发光，并对发光信号进行检测。
1. RT-PCR
首先采用反转录酶以RNA为模板合成 cDNA，然后再以合成的cDNA为模板，经过PCR扩增反应的热变性、引物退火、链延伸三个步骤循环往复，在短时间内扩增得到大量DNA片段。
2. 荧光检出
TaqMan 探针法是使用 5’端带有荧光物质，3’端带有淬灭物质的 TaqMan 探针进行荧光检测的方法。在探针没有被 Taq 酶分解时，5’端的荧光物质受到 3’端淬灭物质的制约，不能发出荧光。而当 TaqMan探针被分解后，5’端的荧光物质便会游离出来，发出荧光。在 PCR 反应液中加入荧光探针后的退火过程中，荧光探针便会和模板配对区域结合。在 PCR 反应的延伸过程中，Taq DNA 聚合酶的 5’→3’核酸外切酶活性可以分解和模板杂交的荧光探针，游离出的荧光物质便会发出荧光。通过检测反应体系中的荧光强度，可以达到检测 PCR 产物扩增量的目的。
产品简介
TaqMan One Step RT-qPCR kit （qRT-PCR Probe）是一步法（One Step）RT-PCR 荧光定量探针法定性、定量反应的专用试剂，反应过程在同一管内连续进行，避免开管，能有效防止污染。本品含有高温反转录酶（RNase H-）和新型热启动酶，具有更高的反转录和 PCR 扩增效率，适合于低浓度RNA 模板的高灵敏度扩增。本试剂采用优化配方的专用 Buffer，可以在较宽的定量区域内得到良 好的标准曲线，准确进行定量，并与多数厂家的荧光定量 PCR 仪兼容，如 Applied Biosystems、 Eppendorf、Bio-Rad 和 Roche 等。
