产品概述
Taq DNA Polymerase 是从克隆有 Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的,其分子量为 94 KD。该酶具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 5’-3’核酸外切酶活性,无 3’-5’外切酶活性。在 PCR反应中,Taq DNA Polymerase 延伸速度为 1-2 kb/分钟,产物 3’端带 A,可直接用于 T/A 载体克隆。该酶无外源核酸酶和细菌基因组 DNA 的污染,稳定性好,特异性强。
适用范围
用于小于 6kb 的对保真度要求不高的 DNA 片段的 PCR 扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定、平末端加A 等,产物可以直接用于 T/A 载体克隆。
建议 PCR 条件:
PCR 体系(以 50μl 反应体系为例)
Template <0.5μg
上游引物(10μM) 1μl
下游引物(10μM) 1μl
10×Buffer(含 Mg2+) 5μl
dNTP(各 2.5mM) 4μl
Taq DNA Polymerase 0.5-1μl
ddH2O up to 50μl
注意事项
1、PCR 反应体系加样时,最后一步加入 Taq DNA Ploymerase,整个过程宜在冰上操作。
2、取 Taq DNA Ploymerase 做 PCR 反应时,请用高压灭菌处理过的吸头。
3、10×Taq Buffer 分为含 15 mM Mg2+和不含 Mg2+两种,不含 Mg2+的 Buffer,另外配有 25 mM MgCl2。如果没有特别指定,通常提供的为含有 15 mM Mg2+的 Buffer。