产品简介
Caspase 3 活性检测试剂盒采用分光光度法,可用于检测细胞、组织裂解液或纯化的 Caspase 3 活性。
Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3 也称 CPP32、Yama 或 apopain,属于 Caspase 家族的 CED-3 亚家族(CED-3 subfamily),是细胞凋亡过程中的一个关键酶,也是哺乳动物细胞中研究最多的一个 Caspase。Caspase 3 可以剪切 pro-Caspase 2、6、7 和 9,并可直接特异性剪切许多 Caspase 底物,包括 PARP (poly (ADP-ribose) polymerase)、ICAD (Inhibitor of Caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin 和 fodrin 等。这些由 Caspase 3 介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,Caspase 3 在细胞核凋亡过程中也起到 了关键作用,包括染色质固缩 (chromatin condensention)、DNA 片段化 (DNA fragmentation)等。同时 Caspase 3 对细胞起泡(Cell blebbing)也起到关键作用。Caspase 3 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase 3 被激活,活化的 Caspase 3 由两个大亚基和两个小亚基组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。
Caspase 3 分光光度法检测试剂盒的原理是将 Caspase 3 序列特异性的多肽(Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被Caspase3 剪切后,黄色发光基团 pNA 游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405 nm 或 400 nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测 Caspase 3 的活性。